«9 февраля 1916 года в командование полком вступил и. д. Начальника Штаба 28 пехотной дивизии Генерального Штаба Полковник Пивоваров, утвержденный в должности командира полка ВЫСОЧАЙШИМ приказом 24 февраля 1916 г».
В 1917 году командование полком принял полковник Василий Иванович Седов, потомственный донской дворянин. Тем не менее в октябре 1917 года полковник Седов принял революцию и продолжил командовать 27 ДКП уже под красными знамёнами.
За время войны 27-й Донской казачий полк в составе 5-й Донской казачьей дивизии воевал в 5-й (в сентябре-октябре 1914 года в составе 1-го конного корпуса) и 2-й армиях на Юго-Западном фронте, 5-й армии на Северо-Западном и Северном фронтах, состоял в резерве Главного командования, воевал в 3-й армии на Западном, Юго-Западном и Западном фронтах, Особой армии на Юго-Западном фронте. Дивизия хорошо проявила себя в томашовском сражении, дралась под Лодзью и Шавлями. В феврале 1915 года полк совместно с 28-м Донским казачьим полком защищал стык 5-й и 4-й армий на реке Пилица у Нового Мяста (46 км северо-западнее г. Варшава), при этом была освобождена деревня Маневичи, а в августе полк совместно с другими полками дивизии прикрывал отход 2-й пехотной и 11-й Сибирской стрелковой дивизий у г. Бельск (40 км южнее г. Белосток).
Боевые действия27 ДКП в 1914 году
17 июля 1914 год. В России объявлена мобилизация. Тем не менее, в уставе «Внутренней службы» для урядников казачьих войск, принадлежавшем казаку станицы Митякинской, хутора Чеботовского, Чёботову Тихану Дмитриевичу, есть запись: «Объявлен поход 1914-го июля 10 дня 27 полку и 44 полку с 1900 по 1910 всем объявили». Судя по всему, мобилизационные мероприятия в донских казачьих полках второй и третьей очереди начали проводиться раньше всеобщей мобилизации. Или это ошибка в дате.
8 августа 1914 год. После того, как 27 ДКП был отмобилизован и сформирован, 8 августа, он, выполняя приказ главнокомандующего, выдвинулся из станицы Каменской к станции Зверево. В состав полка входило 25 офицеров, 2 медицинских врача, 1 ветеринарного врача, 1 делопроизводителя и 960 нижних чинов. Здесь казаки и лошади были погружены в эшелоны и отбыли на станцию Холм. Для перевозки лошадей, личного состава и полкового обоза, требовалось около 150 вагонов. В связи, с чем погрузка полка происходила в несколько этапов.