В) При необходимости готовую среду осветляют (яичный желток).
Г) Фильтруют, стерилизуют 20 минут при 120°С.
3) Желатиновый столбик – простая среда, в пробирке нужна для определения протеолитических свойств бактерий (расщепление белка). Разжижение желатина – протеолитическая активности.
4) Хромотогеные среды (ХС)– питательные среды, позволяющие по окраске колонии делать предварительные заключения о виде выделенного м.о.
Принцип действия ХС– реактивы в составе среды, взаимодействуют с ферментами м.о. специфичными только для этого вида с образованием окрашенных веществ.
Алгоритмы приготовления сложных питательных сред:
1) Среда с углеводами:
А) Сахарный бульон (СБ)– сложная жидкая питательная среда:
1) К МПБ нейтральной реакции «+» 0.25-2% глюкозы (растворяют в небольшом количестве дистиллированной воде).
2)Стерилизуют три дня подряд по 30 мин или однократно в автоклаве при 115°С 30 мин.
Б) Сахарный агар (СА) – сложная плотная питательная среда:
1) КМПА «+» 0.5-2% глюкозы (растворяют в небольшом количестве дистиллированной воде).
2) Стерилизуют три дня подряд по 30 мин или однократно в автоклаве при 115°С 15 мин.
2) Дифференциально –диагностические среды– предназначены ля определения ферментативной активности культур бактерий, это плотные питательные среды или полужидкие по консистенции, содержащие субстрат индикатор, позволяющий по изменению цвета судить о наличие у бактерий исследуемой культуры ферментов для расщепления субстрата.
А) Среда Эндо– среда для выделения энтеробактерий ( группа бактерий, которые вызывают инфекции ЖКТ и др органов):
1)100 мл МПА рH=7.4 расплавляют на водяной бане или в текучепаровом аппарате.
2) Охлаждают до 70°С и «+» 1 грамм лактозы (предварительно растворяют в воде).
3) В отдельной пробирке готовят 2-3 мл насыщенного раствора фуксина.