Опыты проводят на собаках 1-3-летнего возраста. Сразу или на следующий день после завершения обработки зубов испытуемым средством (в режиме, возможно более близком к условиям его клинического применения) изучают проницаемость зубных тканей для меченных радиоактивными элементами веществ путем аппликации их раствора на поверхность эмали. Для этих целей используют меченные >45Са минеральные вещества (например, >45CaCI>2) или меченные >14С органические вещества (например, лизин – 1 >14С или глицин – 2 >14С и др.). Контролем служат одноименные зубы противоположной стороны челюсти, которые обрабатывают контрольным средством.
Определение степени проницаемости эмали и контрольных зубов проводят методом макроавторадиографии с последующей денситометрией в модификации, описанной А. Г. Колесником и П. А. Леусом (1974).
Изучение уровня проницаемости эмали является обязательным критерием при оценке кариесстатического действия средств гигиены полости рта и профилактики кариеса зубов.
В) Определение перехода активных компонентов зубных паст в ротовую жидкость и ткани полости рта. При разработке и испытании той или иной рецептуры новой зубной пасты необходимо выяснить степень и динамику перехода активных компонентов зубных паст в ротовую жидкость и поверхностный слой эмали или слизистую оболочку полости рта и пародонт. При этом исследовании важно определить ротовой клиренс кальция, фосфата, фтора или других активных компонентов, поступающих в ротовую жидкость из испытуемой зубной пасты во время чистки зубов.
■ Определение ротового клиренса. У практически здоровых лиц молодого возраста утром натощак после полоскания рта собирают в мерную пробирку не менее 5,0 мл слюны. Затем проводится чистка зубов испытуемой зубной пастой не менее 3 минут. После этого в течение 2 часов, каждые 15 минут, у испытуемых собирают в мерную пробирку не менее 2,5 мл ротовой жидкости. В собранных пробах ротовой жидкости после ее центрифугирования или фильтрования определяют кальций, фосфор, фтор или другие активные добавки, входящие в рецептуру пасты. По результатам анализа строится график клиренса.
■ Кальций в ротовой жидкости определяют на атомно-абсорбционном спектрофотометре. Предварительно 0,1 мл центрифугата ротовой жидкости разводят в 10 раз 0,10% раствором двунатриевой соли ЭДТА (буфером).