■ Кальций в растворе биоптата эмали определяется на атомно-абсорбционном спектрофотометре с добавление в пробу 0,1% буферного раствора трилона «Б» (двунатриевой соли ЭДТА).
■ Фосфор в пробах биоптата эмали определяется микрометодом Chen, Toribara, Werner (1956). Методика подробно изложена выше.
Толщину деминерализованного слоя эмали рассчитывают по формуле:
h = (m / d) • S
где:
h – толщина эмали (в см);
m – масса растворенного апатита эмали (по кальцию) (в г);
d – удельная масса эмали, равная 2,95 г/см>3;
S – площадь биопсированной поверхности эмали (в см>2).
Масса эмали и содержание фтора в ней при биопсии рассчитывают, исходя из того, что содержание кальция в эмали равно 37 мас.%. При этом содержание фтора в поверхностном слое эмали (в мкг/г или ppm) рассчитывают по формуле:
F = (C>F • V) / m
где:
C>F – концентрация F в мкг/г или р. р. м. в пробе из биоптата эмали;
V– объем пробы в мл (равный 2 мл);
m – масса растворенного апатита эмали (в г).
■ Определение уровня перехода других активных компонентов зубных паст в эмаль зуба и другие ткани полости рта: уровень перехода других (кроме фтора) компонентов зубных паст в эмаль зуба и другие ткани полости рта, таких как кальций, фосфор и т.п., следует изучать методом радиоактивных индикаторов. Для этого в исследуемую пасту вводят радиоактивную метку (например, >45Са, >32Р или другой меченый элемент) в индикаторных дозах (10—100 мкКц на 1 мл исследуемого средства гигиены полости рта), по возможности в том же молекулярном составе. Затем проводят обработку зубов человека (in vitro) или зубов собак (in vivo) такой пастой в приближенном к клиническим условиям режиме. Собственно определение перехода меченных изотопами компонентов зубной пасты в эмаль зуба или другие ткани полости рта можно проводить двумя методами: методом макрорадиоавтографии или послойной биопсии с последующей радиометрией и определением суммарного количества Са и Р в пробе. Для этого к биоптату (5 мкл 0,5 М растворе хлорной кислоты) добавляют 195 мкл деионизи-рованной воды, тщательно перемешивают путем встряхивания и отбирают 100 мкл смеси для радиометрии и по 10 мкл для определения Са атомно-абсорбционным методом и неорганического Р спектрофотометрически. Радиометрию проводят на сцин-тилляционном радиометре после добавления сцинтиллятора, смешивающегося с микрообъемом водно-кислотной пробы (например, смесь метилцеллозольва с толуоловым РРО/РОРОР сцинтиллятором). Рассчитывают следующие показатели: